실험 매개 변수 개선하는 방법
머리 부분을 긁어내는 네거티브 영역을 찍은 스펙트럼 활동으로 흡광도를 조사한 적이 있습니까? 샘플이 음의 흡광도를 갖는 이유는 무엇입니까? 그 파장에서 자연스럽게 빛이 방출되는 것이 있습니까? 응답은 항목의 범위 일 수 있지만, 10 번 중 9 번의 확률로 그 대답은 참조 조건입니다.
광대역 분광법은 많은 에너지 수준 (즉, 광대역 스펙트럼)에서 활동을 다루기 때문에 까다로울 수 있습니다. 예를 들어, 서로 다른 화합물은 서로 다른 영역의 빛과 상호 작용합니다. 또한 흡광도 참조 농도 수준이나 조건에 따라 샘플 측정 값이 기준 상태에서 변경 될 때 이동합니다.
Negative Absorbance Scenarios
한 가지 시나리오는 용제의 활동일지도 모릅니다. 나는 측정을 할 때를 잊어 버리는 것에 대해 매우 유죄입니다. 예를 들어, NIR 범위의 아세토 니트릴에 용해 된 살균제를 Flame-NIR 분광계로 측정 해 봅시다.
Flame-NIR 분광계는 950-1650 nm에서 반응합니다.
그림 1은 아세토 니트릴 솔벤트의 흡광도를 점선 주황색으로 표시하고 순수한 아세토 니트릴을 가벼운 참조로 취한 후 청색을 나타내는 후속 살균제 샘플의 흡광도를 보여줍니다. 살균제 샘플 스펙트럼의 음의 흡광도는 아세토 니트릴이 강한 활성을 갖는 곳과 정확히 관련됩니다. 이것은 실수가 아닙니다. 용액에서 분석 물질의 농도가 증가함에 따라 용매 농도가 감소합니다. 그래서 용매가 광학적으로 활성 상태였던 곳에서는 이제 큐벳, 딥 프로브 (dip probe)의 광학 영역 중 일부가 다른 것에 의해 흡수되므로 흡광도가 저하 될 것입니다.
그림 1. 점선 주황색 선은 아세트 트렌치 흡광도를 나타내며 실선은 살균제 샘플 흡광도를 나타냅니다.
또 다른 시나리오는 각각의 형태가 독특한 광학 활성을 갖는 형태를 변화시키는 분석 종 (analyte species) 자체 일 수있다. 아마도 이것의 가장 일반적인 예는 산도 또는 염기성에 기초한 플립 형태의 리트머스 종이와 같은 pH 염료입니다. 그림 2는 일반적인 pH 염료 인 bromocresol green의 흡광도 반응을 산성 조건에서 가벼운 기준으로 나타낸 것입니다. 이것은 모든 염료 분자가 흡광도가 어디에서나 0으로 설정되었을 때 산성 형태로 존재했다는 것을 의미합니다. 대부분의 pH 염료는 전형적으로 형태 사이의 이동 중에 pH가 독립적으로 유지되는 파장 인 등 흡수점을 갖는다. 이 염료의 경우, 등전점 (낮은 파장) 아래의 활성은 염료의 산성 형태를 나타내며,이 점보다 위에있는 활동은 기본 형태를 나타냅니다. 우리가 pH 레벨을 높게하고 염료 분자의 일부를 산성 형태로부터 기본 형태로 이동 시키면, 산 피크 영역에서 음의 딥 (dip)이 발생하고 염기 피크 영역에서 덩어리가 증가하는 것을 볼 수 있습니다.
그림 2. 일반적인 pH 염료의 흡광도 반응은 산성 조건에서 취한 참조의 영향을 보여줍니다.
그러므로 스펙트럼에서 음의 흡광도를 볼 때 낙심하지 마십시오. 결과는 실제 결과이며 실험에 대해 깊이 생각하고 매개 변수를 향상시킬 수있는 좋은 촉매제가 될 수 있습니다.